当实体组织被分散成单细胞时，分离方法可能会对细胞的性质产生瞬时或持续的影响，例如，表面可见的细胞膜损伤，细胞表面会出现泡状现象，以及线粒体活性很难观察到的变化，蛋白质的丢失等等状况，而细胞的损伤则受许多因素的影响，比如温度，pH，处理时间等等。那对单细胞悬液制备方法有哪些？
酶消化法是实体组织向单细胞分散的主要方法之一。常见的酶有：链霉蛋白酶，胃蛋白酶，中性蛋白酶，胰蛋白酶，木瓜蛋白酶，溶菌酶，弹性蛋白酶等，所使用的酶可以根据分散的组织类型进行确定。 但需注意其使用条件和影响因素，胃蛋白酶在碱性环境下会失去活性，胰蛋白酶在中性溶液中活性会缺失等。
酶的原理有三个主要的方面：破坏组织间的胶原纤维，弹性纤维等，水解组织细胞与结构紧密结合的蛋白，水解粘多糖的组织细胞。
细胞组织在酶消化法下的操作：
1、在离心管中放置适合进行酶消化的组织。
2、向含有消化组织的试管中加入1~2ml选定的酶溶液。
3、在恒温37摄氏度的环境中常规消化20～30min，间歇振荡或吹气消化。
4、收集细胞悬浮物，用尼龙网过滤，去除细胞，低速离心去除细胞碎片。
5、加入2ml的pbs搅拌均匀，离心丢弃并清除。然后再加入0.5毫升的PBS使细胞重悬。
6、荧光标记后，制备好的单细胞悬液将被检测或储存以备后用。
其实对于单细胞悬液制备方法还有很多，今天小编给你们列举的只是其中之一。你还知道哪些有关于单细胞进行悬液制备的方法呢，不如在评论中来给我们一起分享啊。
